Suwuk hromatografiýa boýunça mukdar derňewiniň ýörelgeleri we usullary

Suwuk hromatografiýanyň bölüniş mehanizmi, iki faza üçin garyndydaky komponentleriň ýakynlygynyň tapawudyna esaslanýar.

Dürli stasionar fazalara görä, suwuk hromatografiýa suwuk-gaty hromatografiýa, suwuk-suwuk hromatografiýa we birleşdirilen faza hromatografiýasyna bölünýär.Iň köp ulanylýan, doldurgyç hökmünde silisiýa jeli bilen suwuk-gaty hromatografiýa we matrisa hökmünde mikrosilika bilen birleşdirilen faza hromatografiýasy.

Stasionar fazanyň görnüşine görä, suwuk hromatografiýany sütün hromatografiýasyna, kagyz hromatografiýasyna we inçe gatlak hromatografiýasyna bölmek mümkin.Adorbsion kuwwatyna görä, ony adsorbsiýa hromatografiýasy, bölek hromatografiýasy, ion çalşygy hromatografiýasy we gel geçiriş hromatografiýasy diýip bölmek mümkin.

Soňky ýyllarda aýralyk effektini gowulandyrmak üçin ýokary basyş astynda ykjam fazany çalt akdyrmak üçin suwuk sütün hromatografiýa ulgamyna ýokary basyşly suwuk akym ulgamy goşuldy, şonuň üçin ýokary netijelilik (ýokary basyş diýlip hem atlandyrylýar) suwuk hromatografiýa ýüze çykdy.

Bölüm
01 Suwuk hromatografiýanyň mukdar taýdan derňewiniň ýörelgesi

Hil taýdan kesgitlemek üçin standart hökmünde arassa maddalar talap edilýär;

Suwuk hromatografiýa mukdary deňeşdirip alanyňda mukdar usulydyr: ýagny garyndydaky analitigiň mukdary belli bir mukdarda arassa standart nusgadan hasaplanýar;

Bölüm
02 Suwuk hromatografiýa boýunça bahalandyrmagyň esaslary

Ölçelenen komponentiň (W) mukdary jogap bahasyna (A) (iň beýikligi ýa-da pik meýdany), W = f × A. bilen proporsionaldyr.

San taýdan düzediş faktory (f): mukdar hasaplama formulasynyň proporsional üýtgewsizligi, fiziki manysy bolsa birlik jogap bahasy (pik meýdany) bilen görkezilen ölçenen komponentiň mukdarydyr.

San taýdan düzediş faktoryny adaty nusganyň belli mukdaryndan we jogap bahasyndan alyp bolýar.

Näbelli komponentiň jogap bahasyny ölçäň we komponentiň mukdaryny mukdar düzediş faktory arkaly alyp bilersiňiz.

Bölüm
03 San taýdan derňewde umumy sözler

Mysal (nusga): hromatografiki derňew üçin analitigi öz içine alýan çözgüt.Adaty we näbelli nusgalara bölünýär.

Standart: Belli konsentrasiýasy bolan arassa önüm.Näbelli nusga (bilinmeýän): konsentrasiýasy barlanmaly garyndy.

Nusga agramy: Synag ediljek nusganyň asyl agramy.

Dilýasiýa: Näbelli nusganyň eritme faktory.

Komponent: mukdar taýdan derňelmeli hromatografiki pik, ýagny mazmuny näbelli analitik.

Komponentiň mukdary (mukdary): barlanjak maddanyň mazmuny (ýa-da konsentrasiýasy).

Bitewilik: Hromatografiki pikiň iň ýokary meýdanyny kompýuter arkaly ölçemegiň hasaplama prosesi.

Kalibrleme egrisi: Analitiň näbelli mazmunyny kesgitlemek üçin belli bir mukdarda adaty maddadan kesgitlenen jogap bahasyna garşy komponent mazmunynyň çyzykly egrisi.

Bölüm
04 Suwuk hromatografiýanyň mukdar derňewi

1. San taýdan derňew üçin amatly hromatografiki usuly saýlaň:

l ectedüze çykarylan komponentiň iň ýokary derejesini tassyklaň we 1,5-den uly çözgüdi alyň

l Synag edilen komponentleriň hromatografiki pikleriniň yzygiderliligini (arassalygyny) kesgitläň

l Usulyň kesgitleme çägini we mukdar çägini kesgitläň;duýgurlyk we çyzykly aralyk

2. Dürli konsentrasiýalaryň adaty nusgalary bilen kalibrleme egrisini dörediň

3. San usullarynyň takyklygyny we takyklygyny barlaň

4. Nusga ýygnamagy, maglumatlary gaýtadan işlemegi we netijeleri hasabat bermek üçin degişli hromatografiýa dolandyryş programma üpjünçiligini ulanyň

Bölüm
05 San mukdaryny kesgitlemek (hil)

Bahalandyryljak her hromatografiki pikiri hil taýdan kesgitläň

Ilki bilen, hromatografiki pikiň saklanjak wagtyny (Rt) kesgitlemek üçin adaty nusgany ulanyň.Saklamak wagtyny deňeşdirip, näbelli nusgada her hromatografiki pike laýyk komponenti tapyň.Hromatografiki hil usuly, saklanyş wagtyny adaty nusga bilen deňeşdirmekdir.Kriteriýa ýeterlik dälhasam tassyklamak (hil)

1. Adaty goşma usuly

2. Şol bir wagtyň özünde başga usullary ulanyň: beýleki hromatografiki usullar (mehanizmi üýtgediň, meselem: dürli hromatografiki sütünleri ulanmak), beýleki detektorlar (PDA: spektr deňeşdirmesi, spektr kitaphanasynyň gözlegi; MS: köpçülikleýin spektr derňewi, spektr kitaphanasy gözlegi)

3. Beýleki gurallar we usullar

Bölüm
06 Mukdar derejesiniň yzygiderliligini tassyklamak

Hromatografiki pik yzygiderliligini tassyklaň (arassalygy)

Her hromatografiki pikiň aşagynda diňe bir ölçenen komponentiň bardygyna göz ýetiriň

Bilelikdäki maddalaryň (hapalaryň) päsgelçiligini barlaň.

Hromatografiki pik yzygiderliligini tassyklamagyň usullary (arassalygy)

Spektrogrammalary Photodiode Matrix (PDA) detektorlary bilen deňeşdirmek

Iň ýokary arassalygy kesgitlemek

2996 Arassa burç teoriýasy

Köplenç 07-nji bölümde ulanylýan mukdar usullary

Daşarky standart usula we içerki standart usula bölünen standart egrilik usuly:

1. Daşarky standart usul: suwuk hromatografiýada köp ulanylýar

Adaty nusgalar hökmünde synag ediljek birleşmeleriň arassa nusgalaryny ulanyp, belli konsentrasiýalaryň standart nusgalary taýýarlandy.sütünine jogap bahasyna çenli (iň ýokary meýdany) sanjym edildi.
Belli bir aralykda, adaty nusganyň konsentrasiýasy bilen jogap bahasynyň arasynda W = f × A arasynda gowy çyzykly baglanyşyk bar we adaty egrilik edilýär.

Edil şol bir synag şertlerinde, ölçeljek komponentiň jogap bahasyny almak üçin näbelli nusgany sanjym ediň.Belli koeffisiýentine görä, ölçeljek komponentiň konsentrasiýasyny alyp bolýar.

Daşarky standart usulyň artykmaçlyklary:ýönekeý işlemek we hasaplamak, köplenç ulanylýan mukdar usulydyr;her bir komponentiň tapylmagyna we uzaldylmagyna zerurlyk ýok;standart nusga talap edilýär;standart nusganyň we näbelli nusganyň ölçeg şertleri yzygiderli bolmaly;sanjymyň göwrümi takyk bolmaly.

Daşarky standart usulyň kemçilikleri:Synag şertleri ýokary bolmaly, meselem, detektoryň duýgurlygy, akym tizligi we ykjam fazanyň düzümi üýtgedilip bilinmez;her sanjymyň göwrümi gowy gaýtalanmalydyr.

2. Içerki standart usul: takyk, ýöne kynçylykly, iň köp ulanylýan usullarda

Içerki standartyň belli bir mukdary garyşyk standart döretmek üçin goşulýar we belli konsentrasiýanyň iş standartlary taýýarlanýar.Garyşyk standartdaky standartyň içerki standartyna bolan gatnaşygy üýtgemez.Hromatografiki sütüne sanjym ediň we jogap bahasy hökmünde alyň (standart nusga pik meýdany / içerki standart nusga pik meýdany).Jogap bahasy bilen iş standartynyň konsentrasiýasynyň, ýagny W = f × A arasyndaky çyzykly gatnaşyga görä, adaty egrilik edilýär.

Belli bir mukdarda näbelli nusga goşulýar we ölçeljek komponentiň jogap bahasyny almak üçin sütüne sanjylýar.Belli koeffisiýentine görä, ölçeljek komponentiň konsentrasiýasyny alyp bolýar.

Içerki standart usulyň aýratynlyklary:Amal wagtynda, nusga we içerki standart birleşdirilip, hromatografiki sütüne sanjym edilýär, ölçenen komponentiň mukdarynyň garyşyk erginde içerki standart bilen gatnaşygy hemişelik bolsa, nusganyň göwrüminiň üýtgemegi. mukdar netijelerine täsir etmez..Içerki standart usul, nusga göwrüminiň, hatda ykjam fazanyň we detektoryň täsirini öçürýär, şonuň üçin daşarky standart usuldan has takyk.

Bölüm
Mukdar derňewiniň netijelerine täsir edýän 08 faktor

Oraramaz takyklyk aşakdakylara sebäp bolup biler:

Nädogry pik meýdanynyň integrasiýasy, nusga taýýarlanylanda girizilen nusgalaryň bölünmegi ýa-da hapalar, möhürlenmedik flakon, nusga ýa-da çözüjiniň üýtgemegi, nädogry nusga taýýarlanyşy, sanjym meselesi, içerki standart nädogry taýýarlyk

Nädogry takyklygyň ähtimal sebäpleri:

Nädogry pik integrasiýasy, sanjym ýa-da injektor problemalary, nusga taýýarlanylanda girizilen hapalar ýa-da hapalar, hromatografiki meseleler, detektoryň peselmegi